無(wú)縫克隆的10 μl反應(yīng)體系中，2-3 個(gè)組裝片段總加入量建議在0.03-0.2 pmol，4-6 個(gè)組裝片段總加入量建議在0.2-0.5 pmol。
計(jì)算線(xiàn)性化片段（包括載體和插入片段）的使用量，推薦以下計(jì)算公式：
線(xiàn)性化片段用量(ng)=皮摩爾數(shù)（pmols） × 堿基對(duì)數(shù)(bp）× 0.65 kDa
注：最優(yōu)反應(yīng)體系通常含有載體50-100 ng，各插入片段的摩爾數(shù)是載體的2-3倍。
任意輸入兩個(gè)參數(shù)：線(xiàn)性化片段的用量、pmols數(shù)、片段堿基對(duì)數(shù)，計(jì)算第三個(gè)參數(shù)結(jié)果。
（線(xiàn)性化片段）
（堿基對(duì)數(shù)）
| 計(jì)算結(jié)果 | 線(xiàn)性化片段質(zhì)量 | pmols | 堿基對(duì)數(shù) |
|---|---|---|---|
